可通過以下方法降低轉基因探針法PCR試劑盒存在的誤差
點擊次數：692 更新時間：2023-01-05
轉基因探針法PCR試劑盒是使用聚合酶鏈式反應進行的核酸同步擴增和檢測/定量的方法，是一種可支持研究應用的多用途強大工具，查找經過優化的實時預混液、試劑和試劑盒，推動您的實驗進展。適用于常規的反應和一些結構復雜的模板如GC含量高、有二級結構等的擴增，由于多種增強劑和穩定劑的發現，穩定預配好的混合液不僅簡化了操作程序、減少了污染、降低勞動強度和取樣誤差。
那么如何降低轉基因探針法PCR試劑盒可能存在的誤差呢？
1、注意試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。
2、仔細閱讀說明書，嚴格按照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復試驗確定成立后才能改進。
3、檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結和分析問題的能力，對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。
4、使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
5、洗滌*，如若洗板不*，酶結合物本底顯色會呈現假陽性。洗滌液要新鮮，現用現配，陳舊的洗滌液會出現本底增高現象，也可能出現假陽性。
6、評估試劑的實用性，試劑的穩定與否，對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用。
7、嚴控反應時間，反應時間過長，酶失活；反應時間過短，酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合，生成物結構松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。
8、嚴格掌握顯色時間，顯色時間過短，加入終止液反應終止后，底物結合物的量過少，易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色，應判為假陽性，這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色，不可報陽性，這可能是本底顯色的結果。
